宁波葡萄籽提取物花青素检测 抗氧化能力评定

葡萄籽提取物是从葡萄籽中提取分离得到的一类多酚类物质，主要由原花青素、儿茶素、表儿茶素、没食子酸、表儿茶素没食子酸酯等多酚类物质组成，其中原花青素是葡萄籽提取物的主要活性成分。关于葡萄籽提取物中花青素（原花青素）的含量检测及抗氧化能力评定，以下是一些常用的方法和指标：

一、花青素（原花青素）含量检测

Bate-Smith法




原理：原花青素在酸性条件下加热转化为红色的花青素，通过测定吸光度来计算原花青素的含量。

步骤：称取适量的葡萄籽提取物，用甲醇溶解并定容，取部分溶液加入盐酸-正丁醇溶液，在特定温度下反应后测定吸光度。

结果表示：使用原花青素指数来表示提取物中原花青素的相对含量。但此方法测定的结果重现性较差，且原花青素在此条件下反应可能不彻底。










Porter法




原理：在Bate-Smith法的基础上，通过添加Fe3+来提高反应的程度和颜色的稳定性，从而测定原花青素的相对含量。

步骤：与Bate-Smith法类似，但在反应液中加入硫酸铁铵溶液。

结果表示：使用PVU（porter value unit）来表示提取物中原花青素的相对含量。美国葡萄籽方法评定认为PVU在250~350之间是比较理想的。










高效液相（HPLC）与Folin-Ciocalteau法结合




原理：通过HPLC测定提取物中单体的含量，使用Folin-Ciocalteau法测定总多酚的含量，然后用总多酚的含量减去单体的含量来求得原花青素的含量。

步骤：先使用HPLC测定儿茶素、表儿茶素等单体的含量，然后使用Folin-Ciocalteau法测定总多酚的含量，并进行计算。

优点：此方法能够弥补Bate-Smith法和Porter法只能测定原花青素相对含量的缺陷，提供更准确的含量信息。

二、抗氧化能力评定

DPPH法




原理：DPPH（二苯基苦味肼基自由基）是一种稳定的以氮为中心的自由基，在特定波长处有较大吸收。当加入抗氧化剂（如葡萄籽原花青素）时，DPPH自由基的数量会减少，溶液颜色变浅，吸光度降低。通过测定吸光度的变化可以计算抗氧化剂的抗氧化能力。

步骤：配制DPPH标准溶液和葡萄籽原花青素溶液，将两者混合后测定不同时间的吸光度值，根据标准曲线计算DPPH残留率，从而评估抗氧化能力。

结果表示：通常使用自由基清除能力AE（Antiradical efficiency）来表示抗氧化剂的抗氧化能力。AE越大，说明抗氧化剂的清除自由基能力越强。










硫氰酸铁法




在某些研究中，也使用硫氰酸铁法来测量葡萄籽提取物的抗氧化活性。该方法通过测量在亚油酸模型系统中抑制脂质氧化的能力来评估抗氧化活性。

综上所述，葡萄籽提取物中花青素（原花青素）的含量检测及抗氧化能力评定有多种方法可供选择。在实际应用中，可以根据具体需求和实验条件选择合适的方法进行测定和评估。